默克HPTLC高效薄層析板

默克HPTLC高效薄層析板

南通海箬化學(xué)有限公司

和傳統(tǒng)的薄層層析板相比，高效薄層層析板擁有不可替代的優(yōu)勢，具體如下：

分離速度大大加快，節(jié)省約一半的時(shí)間

靈敏度大幅度提高，約5-10倍。

重現(xiàn)性更好，色帶更窄，適合于定量分析。

HPTLC

主要顆粒粒徑5-6um

粒徑分布4-8um

涂層厚度200μm (100μm)

常規(guī)展開距離3-6cm

常規(guī)分離時(shí)間3-20min

上樣體積0.1-0.5μl

檢出限5-10pg

TLC

主要顆粒粒徑10-12um

粒徑分布5-20um

涂層厚度250um

常規(guī)展開距離10-15cm

常規(guī)分離時(shí)間20-200min

上樣體積1-5u1

檢出限50-100pg

TLC 和 HPTLC 的比較

TLC

定性分析

-檢出限 50-100pg

-UV

-價(jià)格低廉

HPTLC

-定性定量分析

-檢出限5-10pg

-儀器掃描分析

-價(jià)格相對較高

訂貨信息

HPTLC silica gel 60

HPTLC silica gel 60 F 254s

HPTLC silica gel 60 F 254

HPTLC silica gel 60 WRF 254S

HPTLC silica gel 60 F 254 AMD, extra thin*

HPTLC silica gel 60 WRF 254s AMD, extra thin*

New HPTLC Premium Purity Plate

1.05641.0001

1.05631.0001

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1.15696.0001

1.05642.0001

1.05628.0001

1.05629.0001

1.05616.0001

1.05547.0001

1.05548.0001

1.05556.0001

1.15552.0001

1.11764.0001

1.12363.0001

1.05648.0001

分離時(shí)間更短，約可縮短20%

分離效果更好

檢出限更低

訂貨信息

HPTLC LiChrospher® silica gel 60 F254 20 x1025 plates 1.15445.0001

HPTLC LiChrospher@ silica gel 60 F 254s 20 x2025 plates 1.05586.0001

HPTLC LiChrospher@ silica gel 60 AMD WR F254s extra thin*20 x 1025 plates 1.05647.0001

HPTLC LiChrospher@ silica gel 60 RP-18 WF254s 20 x1025 plates 1.05646.0001

薄層色譜法對固定相的要求

1大的表面積和足夠大的吸附能力,一般是多孔的顆粒狀、纖維狀物質(zhì)

2在所用的溶劑及展開劑中不溶解,與展開劑及樣品沒有化學(xué)作用:

3有可逆的吸附性,即既能吸附樣品組分,吸附后又易被溶劑解吸;

4顆粒均勻,在使用過程中不會變性和碎裂;

5最好為白色固體,這樣可便于觀察結(jié)果。

制備薄層色譜(PTLC)操作流程：上樣--展開--檢測--刮板--洗脫

樣品要求：因?yàn)楣枘z板是弱酸性的，對酸不穩(wěn)定的化合物盡量避免爬大板；對空氣，水，有機(jī)溶劑穩(wěn)定； 低沸點(diǎn)的溶劑里要好溶；最好有紫外吸收；極性不能太大（至少展開劑能爬起來）。

上樣：盡量少的溶劑溶解樣品，最好是易揮發(fā)的，二氯甲烷常用，如果不溶可以加幾滴甲醇促溶。可以用一次性滴管塞棉花后剪成毛筆狀上樣，每個(gè)人的辦法都不同，小編就是這么弄的，順便練練毛筆字。上樣時(shí)也最好像寫毛筆字一樣一氣呵成，這樣跑出來的帶比較均勻。如樣品溶液太多需要上兩遍樣，先用吹風(fēng)機(jī)吹干溶劑后再上樣。通常情況下，每塊20X20的大板上樣量：40-60mg; 如果反應(yīng)比較雜的話，可適當(dāng)減少上樣量；上樣的樣品帶距離兩端大約1cm, 距離底邊大約2-3cm，總之控制樣品帶的高度一定要高于展開缸中展開劑的高度。

展開：展開之前，一定將溶劑吹干或晾干，否則會導(dǎo)致色帶的形狀不規(guī)則。展開劑的選擇，先用小板爬樣，具體怎么爬小板，請回看往期文章（TLC薄層層析技術(shù)），選到合適的展開劑后，配好溶劑爬大板，由于大板和小板由細(xì)微的差別，大板展開劑的極性可以稍微比小板展開劑的極性大一點(diǎn)，一樣的話也問題不大。跑板最好要跑到快頂端1cm左右，充分展開樣品，切記不要跑過，跑過的話，極性小的點(diǎn)可能會被展開劑沖都一起，而極性大的點(diǎn)雖然不會沖到上面，但會變散，不容易判斷色帶的邊緣。

另外，如果上樣的色帶較寬或者不規(guī)則，可以在展開之前提前利用大極性溶劑預(yù)展開2-3cm，將寬色帶壓縮成窄帶，然后拿出來重新吹干，然后再正常展開。

展開時(shí)，和爬小板類似，要保持展缸內(nèi)較高的蒸汽壓，最好用重物壓緊展缸蓋。如果展缸有裂紋的話，二氯甲烷甲醇體系千萬不要用，石油醚乙酸乙酯體系可以考慮，總之效果都不好。

如果一次展開后，發(fā)現(xiàn)分離效果不佳，可以考慮吹干后重復(fù)展開。

檢測：產(chǎn)品的判斷，通過極性大致判斷哪幾個(gè)色帶可能是產(chǎn)品，然后每個(gè)色帶可以先刮一點(diǎn)，碾碎，加甲醇溶解，過濾送LCMS檢測判斷。

能爬大板的樣品一般是有紫外吸收的化合物，這樣可以準(zhǔn)確判斷產(chǎn)物的準(zhǔn)確位置并取得較好的純化效果。沒有紫外吸收的化合物也可以爬大板，但是得到產(chǎn)物的純度全靠運(yùn)氣了！建議使用微量柱層析純化【25mg的樣品如何柱層析？】。無紫外吸收的樣品可以參照以下方法盲刮，我們將制備板的一側(cè)進(jìn)行部分顯色，活用玻璃刀將TLC板分割下小部分，通過部分的顯色情況，來反推整塊板的顯色情況，所以相對的對板的展開效果的要求比較高，如果爬的色帶不規(guī)則，那很難得到純的產(chǎn)物。

其實(shí)不用切割下來，也可以顯色，利用滴管在板邊緣涂顯色劑，然后顯色，效果也可以。

產(chǎn)物色帶的判斷：如果有標(biāo)樣點(diǎn)的話，可以跟標(biāo)樣點(diǎn)TLC檢測對照；如果沒有標(biāo)樣點(diǎn)的話可以將TLC—LCMS或NMR組合判斷；有時(shí)在大板展開后，可能會出現(xiàn)像下方第3塊板的情況，兩條色帶距離特別近，不好判別是不是一個(gè)東西，造成這種狀況的原因可能是過載或受潮，建議大家將兩條色帶分別刮取后與標(biāo)點(diǎn)對照來展開判斷是不是一個(gè)東西，再確定能不能合并。

刮板：判斷好色帶后，在紫外燈下，用鉛筆描好熒光帶，開始刮板。帶好口罩很重要，小編是用平頭雕刻筆刀刮板的，非常好用。另外非常重要的是，在確定得到所需產(chǎn)物之前，不要輕易丟棄制備板。

洗脫：刮好的硅膠，量少的話，可以隔著稱量紙用試管搟碎。量多的話，直接裝到自封袋里面隨便蹂躪，直到成粉末為止。粉末狀的硅膠樣品的洗脫，大部分人是直接加溶劑泡出來。但小編用的是，把硅膠粉直接裝到柱子（有底層砂芯的那種）里，上層鋪一薄薄的石英砂，直接像過柱子一樣在上層加溶劑壓出來，這種方法的好處就是，對于溶解性不好的樣品也可以用相對較少的溶劑洗快速洗出產(chǎn)品。加入溶劑洗脫的時(shí)候可以隨時(shí)點(diǎn)板看產(chǎn)品是否已經(jīng)全洗出。盡量選擇溶解度好并且極性小的溶劑，通常可用二氯甲烷或者乙酸乙酯，如果化合物溶解度較差時(shí)，也可選用二氯甲烷：甲醇10：1的混合溶劑進(jìn)行洗脫，防止溶解過多硅膠，洗脫劑避免加入過多的甲醇。

默克HPTLC高效薄層析板